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Inmunofenotipado por citometría de flujo para la orientación diagnóstica y clasificación del cáncer pediátrico basado en el tubo de orientación de tumores sólidos EuroFlow (STOT)

En la actualidad, la mayoría de los países de la Unión Europea (UE) no cuentan con un sistema de vigilancia de la salud pública. Aunque la citometría de circulación multiparamétrica (MFC) ha demostrado ser de gran utilidad en el pronóstico y la clasificación de las neoplasias hematológicas, su utilidad para los tumores pediátricos no hematopoyéticos sigue siendo limitada.

Aquí hemos diseñado y validado prospectivamente una nueva combinación de anticuerpos de ocho colores – tubo de orientación de tumores sólidos, STOT – para el cribado diagnóstico de cánceres pediátricos mediante MFC. Un total de 476 muestras (139 de masa tumoral, 138 de médula ósea, 86 de ganglios linfáticos, 58 de sangre periférica y 55 de diferentes fluidos corporales) de 296 pacientes con sospecha diagnóstica de cáncer pediátrico fueron analizadas mediante MFC frente a procedimientos diagnósticos estándar.

MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit
Bioingentech
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MULTIPLEX KIT PCR Babesia & Theileria PCR kit
Bioingentech
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ranavirus PCR kit
Bioingentech

STOT se diseñó tras una serie de ciclos de diseño-prueba-evaluación-rediseño basados principalmente en un gran panel de combinaciones de anticuerpos monoclonales examinados en 301 muestras. En su modelo definitivo, STOT consiste en una única mezcla de anticuerpos de 8 colores y 12 marcadores. La validación potencial de STOT en 149 muestras confirmó resultados concordantes con el pronóstico WHO/ICCC-Three de la persona afectada en 138/149 casos (92,6%).

Custom Antibody titration by ELISA up to 2 rabbits and 1 bleed
ELISA-1 Alpha Diagnostics
Beta2-Microglobulin ELISA kit ELISA Kit
LF-EK60047 Abfrontier
Chicken thrombomodulin,TM ELISA KIT ELISA
QY-E80092 Qayee Biotechnology
Oxycodone ELISA
EK7130 BosterBio
Amphiphysin ELISA
LF-EK0189 Abfrontier

En resumen, aquí diseñamos y validamos una nueva mezcla estandarizada de anticuerpos y un ensayo MFC para el cribado diagnóstico de tumores pediátricos estables que puede contribuir a una orientación diagnóstica rápida y correcta y a la clasificación de la mayoría de los cánceres pediátricos en la observación científica rutinaria.

Flow Cytometry Immunophenotyping for Diagnostic Orientation and Classification of Pediatric Cancer Based on the EuroFlow Solid Tumor Orientation Tube (STOT)

Custom Antibody titration by ELISA up to 2 rabbits and 1 bleed
ELISA-1 Alpha Diagnostics
Beta2-Microglobulin ELISA kit ELISA Kit
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Distribución, forma y rasgos inmunohistoquímicos de las células neuroendocrinas inmunorreactivas a la serotonina dentro de la uretra y los órganos genitales periuretrales en ratones

El objetivo de esta investigación es aclarar la distribución, la forma y los rasgos inmunohistoquímicos de las células neuroendocrinas inmunorreactivas a la serotonina (SIR-NECs) en la próstata del ratón y dentro de los órganos genitales circundantes mediante la evaluación histológica e inmunohistoquímica de las secciones seriadas microscópicas de la uretra.

Custom development of ELISAs for other species or antibody isotypes not listed in the catalog. Custom testing of samples for IgG/IgM/IgA or total (IgG+IgM+IgA)
000-CUS Alpha Diagnostics
Alpha-bungarotoxin, CF405s
00002 Cusabio
Alpha-bungarotoxin, CF405s
00002-100ug Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
9-00003 Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
9-00003 Biotium

Recogimos vías urinarias disminuidas de ratones de 13 semanas de edad y observamos la muestra de distribución y la forma de las SIR-NECs mediante microscopía leve seriada. Los órganos de las secciones se habían dividido en tres zonas anatómicas para dejar clara la muestra de distribución de las SIR-NECs: (1) zona A, los conductos próximos a la uretra prostática; (2) zona B, los conductos al exterior del esfínter uretral; y (3) zona C, las áreas del acino.

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000-CUS Alpha Diagnostics
Alpha-bungarotoxin, CF405s
00002 Cusabio
Alpha-bungarotoxin, CF405s
00002-100ug Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
9-00003 Biotium

Las secciones habían sido doble inmunotinción con anticuerpos contra la serotonina y uno entre los elementos neuroendocrinos relacionados (NRF), junto con 10 marcadores de células neuronales y ocho neurotransmisores, y, además, 4′,6-diamino-2-fenilindol (DAPI). Además, las SIR-NEC se sometieron a una doble inmunotinción con anticuerpos contra la citoqueratina 5 (CK5) y p63, junto con DAPI.

Custom development of ELISAs for other species or antibody isotypes not listed in the catalog. Custom testing of samples for IgG/IgM/IgA or total (IgG+IgM+IgA)
Alpha Diagnostics
Alpha-bungarotoxin, CF405s
Cusabio
Alpha-bungarotoxin, CF405s
Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
Biotium

Las SIR-NEC se habían localizado principalmente en la zona A, y no se habían observado SIR-NEC en la zona C. La proporción de SIR-NEC en forma de frasco era aproximadamente del 15% en las zonas A y B. No se habían observado SIR-NEC en forma de frasco en los epitelios uretrales. Los NRFs co-localizados con SIR-NEC habían sido el péptido relacionado con el gen de la calcitonina, CD56, cromogranina A, enolasa específica de neurona, proteína citoplástica neuronal 9.5 y sinaptofisina.

Custom Antibody titration by ELISA up to 2 rabbits and 1 bleed
Alpha Diagnostics
Frit Kit
Next Advance
Column Packing Kit
Next Advance

CK5 y p63 no se co-localizaron con SIR-NECs. En esta investigación, las SIR-NEC de la uretra y los órganos genitales circundantes eran ubicuas en la uretra y los conductos próximos a la uretra y co-expresaban determinados NRF relacionados con los nervios.

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ELISA-1
Frit Kit
FRIT-KIT
Column Packing Kit
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La identificación de las densidades de células inmunes endometriales y la evaluación de la agrupación dentro de la sección media lútea como predictor de los resultados de estar embarazada después de la terapia de FIV-ET.

 

Se ha informado de que los ajustes en la densidad de células inmunes endometriales están relacionados con el fracaso reproductivo. El valor pronóstico de la medición de la densidad de células inmunitarias endometriales sigue siendo incierto. Nuestro objetivo era investigar el valor pronóstico de la medición de las células inmunitarias endometriales en el resultado final del embarazo tras la FIV en mujeres.

En esta investigación potencial, 100 veintiocho damas se sometieron a muestreo endometrial en un ciclo puro previo único congelado-descongelado embrión interruptor (ET). La biopsia endometrial se obtuvo exactamente 7 días después del aumento de la hormona luteinizante (LH + 7). Se empleó una metodología inmunohistoquímica multiplex para teñir simultáneamente las muestras de endometrio con un panel de anticuerpos humanos contra CD56 para células uterinas asesinas puras (uNK), CD3 y CD8 para células T, CD3 para células pan-T y CD68 para macrófagos.

100 BP DNA LADDER, 500UL PER KIT
M-DNA-100BP CORNING
1 KB DNA LADDER, 500UL PER KIT
M-DNA-1KB CORNING
DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-.1 ApexBio
DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-.25 ApexBio
DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library
L1033-5 ApexBio

. Se midió la densidad de las distintas células inmunitarias y los intervalos de agrupación entre ellas. La TE se llevó a cabo en la fase de blastocisto. Las mujeres que no habían concebido presentaban una densidad considerablemente mayor de células uNK y un mejor grado de agrupación entre células uNK y macrófagos que las mujeres que sí habían concebido.

Protein A protein
Fitzgerald
pLDH Protein Protein
Abbexa
pLDH Protein Protein
Abbexa

De acuerdo con esto, el valor pronóstico de la medición de uNK en el resultado final del embarazo mejoró considerablemente cuando se mezcló con la evaluación simultánea de la agrupación entre uNK y macrófagos. En conjunto, nuestros resultados instaron a que la densidad de células uNK y la etapa de agrupación entre las células uNK y macrófagos también podría ser un prometedor predictor para la implantación rentable después de la FIV-ET.

Paraffin Wax Dispenser
Scientific Laboratory Supplies
Paraffin wax, granular (56 - 60)
Glentham Life Sciences
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Glentham Life Sciences
MagSi-WAX
AMSBIO
MagSi-WAX
AMSBIO

Las células MAIT estabilizan las necesidades de tolerancia inmunitaria y protección antimicrobiana durante el embarazo

Las células T invariantes asociadas a la mucosa (MAIT) son un subconjunto de células T innatas con características efectoras proinflamatorias y citotóxicas. Durante el embarazo, la modulación del sistema inmunitario materno, tanto en la interfaz feto-materna como sistémicamente, es esencial para un resultado final rentable y se manifiesta mediante el aumento controlado de las respuestas innatas y la atenuación de las adaptativas.

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No obstante, las defensas inmunitarias tienen que proteger eficazmente a la madre y al feto de una infección. Hasta ahora, se desconoce si las células MAIT están sometidas o no a inmunomodulación durante el embarazo, y la caracterización de las células deciduales MAIT, además de sus respuestas útiles durante el embarazo, son principalmente inexistentes.

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Aquí hemos caracterizado la presencia y el fenotipo de las células MAIT Vα7.2+CD161+ en la sangre y la decidua (el endometrio uterino durante el embarazo) de mujeres embarazadas durante el primer trimestre, es decir, el momento en el que se desarrolla la tolerancia inmunitaria nativa. Además, evaluamos el fenotipo y las respuestas útiles de las células MAIT en la sangre de mujeres embarazadas en el tercer trimestre, es decir, cuando la inmunomodulación sistémica es más pronunciada.

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Los paneles de citometría circulante multicolor incluían marcadores de subconjuntos MAIT y marcadores de activación (CD69, HLA-DR, granzima B) e inmunorregulación (PD-1, CTLA-4). Las células MAIT habían disminuido numéricamente en la interfase feto-materna y confirmaron, al igual que diferentes células T dentro de la decidua, una expresión elevada de marcadores de puntos de control inmunitarios en contraste con las células MAIT en sangre.

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9-00003 Biotium
Alpha-bungarotoxin, CF680r
9-00003 Biotium

En el transcurso del 3er trimestre, las células MAIT circulantes confirmaron la siguiente expresión de CD69 y CD56, y sus respuestas útiles a los estímulos inflamatorios (anticuerpos activadores anti-CD3/CD28, e IL-12 e IL-18) y microbianos (Escherichia coli, estreptococos del grupo B y virus de la gripe A) habían sido típicamente elevadas en contraste con las células MAIT de mujeres no embarazadas, lo que indica defensas antimicrobianas mejoradas durante el embarazo.

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En conjunto, nuestros hallazgos apuntan a un doble papel para las células MAIT durante el embarazo, con un potencial evidentemente bien adaptado para estabilizar las necesidades de tolerancia inmune en paralelo con el mantenimiento de las defensas antimicrobianas. Dado que las células MAIT se activan simplemente, deben ser estrictamente reguladas durante el embarazo, y la falta de acción puede contribuir a los problemas del embarazo.

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