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Análisis cuantitativo de una proteína biofarmacéutica en muestras de cultivo celular mediante western blot automatizado por electroforesis capilar (CE).

Una técnica de gestión eficaz es crucial para garantizar la seguridad, pureza y eficacia de los productos biofarmacéuticos. Los instrumentos analíticos aceptables son necesarios para apreciar tales objetivos, ofreciendo información sobre la calidad del producto en una etapa temprana para ayudar a la comprensión y la gestión del curso de la fabricación.

En este trabajo, se utiliza un instrumento multicapilar completamente automatizado para la separación basada en el tamaño y la evaluación western blot para proporcionar una lectura temprana de la calidad del producto con el fin de permitir un proceso de fabricación más constante. Esta estrategia tiene como objetivo medir dos cualidades esenciales de una proteína biofarmacéutica, el título y la distribución de isoformas, en muestras de cosecha de tradición celular.

MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit
Bioingentech
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PCR-EZ D-PCR MASTER MIX
Bio Basic
MULTIPLEX KIT PCR Babesia & Theileria PCR kit
Bioingentech
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Bioingentech

Los conocimientos adquiridos sobre la distribución de isoformas pueden utilizarse para predecir los valores correspondientes de la sustancia farmacológica final y, probablemente, ofrecer información para el tratamiento mediante un ajuste oportuno del proceso de purificación posterior, en caso de que los valores previstos queden fuera de la gama aceptada.

Rat Cholesterol ELISA ELISA
E01A11128 BlueGene
Goat Cholesterol ELISA ELISA
E01A46041 BlueGene
Mouse Cholesterol ELISA ELISA
E01A19869 BlueGene
Human Cholesterol ELISA ELISA
E01A2368 BlueGene
Sheep Cholesterol ELISA ELISA
E01A98335 BlueGene

Unión de protoporfirina de zinc a complejos de telomerasa e inhibición del ejercicio de la telomerasa
La protoporfirina de zinc (ZnPP), una metaloprotoporfirina (MPP) de origen natural, está actualmente en auge como agente quimioterapéutico, aunque su mecanismo no está claro. Cuando se examina en oposición a diferentes MPPs, ZnPP fue la mejor síntesis de ADN y el inhibidor de la proliferación móvil, mientras que la venta de la apoptosis en la telomerasa constructiva sin embargo no telomerasa células destructivas.

Rat Cholesterol ELISA ELISA
E01A11128 BlueGene
Rat Cholesterol ELISA ELISA
E02C0745-48wellsplate BlueGene

Al mismo tiempo, el ZnPP reguló a la baja la expresión de la telomerasa y fue el inhibidor total perfecto del ejercicio de la telomerasa en células intactas y extractos móviles con valores de IC50 y EC50 de aproximadamente 2,5 y 6 µM, respectivamente. Las propiedades de fluorescencia pura de la ZnPP permitieron la obtención directa de imágenes en fracciones móviles mediante electroforesis en gel de agarosa no desnaturalizante, western blots y microscopía confocal de fluorescencia.

Porcelain Buchner Funnel 200 ml, each
-LPC-146 IHC World
10 mm Diameter Solid Titanium Tip
0-120-0009 Biologics
13 mm Diameter Tapped Titanium Tip
0-120-0010 Biologics
13 mm Diameter Solid Titanium Tip
0-120-0011 Biologics
19 mm Diameter Tapped Titanium Tip
0-120-0012 Biologics

La ZnPP se localizó en complejos móviles masivos (>600 kD) que contenían telomerasa y disquerina, como confirmaron los análisis de cambio de movilidad de inmunocomplejos, inmunoprecipitación e inmunotransferencia. La investigación con fluorescencia confocal confirmó que la ZnPP se co-localizaba con la transcriptasa inversa de la telomerasa (TERT) y los telómeros dentro del núcleo de las células sincronizadas en fase S. ZnPP, además, co-localizado con TERT dentro de las áreas perinucleares de las células de la sección de registro, sin embargo, no co-localizar con los telómeros en los extremos de los cromosomas metafase, un sitio web reconocido por estar desprovisto de complejos de telomerasa.

Porcelain Buchner Funnel 200 ml, each
-LPC-146 IHC World
10 mm Diameter Solid Titanium Tip
0-120-0009 Biologics
13 mm Diameter Tapped Titanium Tip
0-120-0010 Biologics
13 mm Diameter Solid Titanium Tip
0-120-0011 Biologics

Total, estos resultados recomiendan que ZnPP no se une a secuencias teloméricas per se, sin embargo, alternativamente, interactúa con diferentes partes estructurales de la telomerasa avanzado para inhibir el ejercicio de la telomerasa. En conclusión, la ZnPP interfiere activamente con el ejercicio de la telomerasa en células neoplásicas, vendiendo así propiedades pro-apoptóticas y anti-proliferativas. Estos conocimientos ayudan al crecimiento adicional de protoporfirinas artificiales o naturales que se utilizarán como agentes quimioterapéuticos para reforzar los protocolos terapéuticos actuales para enfermedades neoplásicas.

Quantitative analysis of a biopharmaceutical protein in cell culture samples using automated capillary electrophoresis (CE) western blot.

Porcelain Buchner Funnel 200 ml, each
IHC World
10 mm Diameter Solid Titanium Tip
Biologics
13 mm Diameter Tapped Titanium Tip
Biologics
13 mm Diameter Solid Titanium Tip
Biologics

La cofilina 2 actúa como enlace inflamatorio entre la periodontitis persistente y la enfermedad de Alzheimer en ratones con proteína precursora amiloide/presenilina 1

Cada vez más pruebas han demostrado una correlación entre la periodontitis continua (PC) y la enfermedad de Alzheimer (EA). Sin embargo, todavía hay una escasez de pruebas directas, y en particular las moléculas clave para unir las 2 dolencias. Esta investigación tiene como objetivo analizar los posibles vínculos proteicos entre la PC y la EA a través de la faceta inflamatoria.

Beta2-Microglobulin ELISA kit ELISA Kit
Abfrontier
Human IL-17E ELISA Kit ELISA kit
EnoGene
Human IL-17E ELISA Kit ELISA kit
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El hipocampo de ratones maniquí CP y los controles se han recogido, y los ajustes en la expresión de proteínas se han evaluado mediante electroforesis bidimensional diferencial en gel (2D-DIGE) evaluación mezclada con cromatografía líquida en tándem espectrometría de masas. Un total de 15 proteínas expresadas diferencialmente se han reconocido en ratones maniquí CP, en contraste con los controles.

Beta2-Microglobulin ELISA kit ELISA Kit
LF-EK60047
Human IL-17E ELISA Kit ELISA kit
E22-HC180.48
Human IL-17E ELISA Kit ELISA kit
E22-HC180.96

Entre ellos, S100-A9, transtiretina, Cofilin 2, peroxiredoxina 2, y lipocalina-2 han sido validados por Western blot sobre la base de su gemelo operar cada uno en la irritación y la EA. Sobre la base de la evaluación 2D-DIGE, CP maniquí animal había aumentado los rangos de S100-A9, Cofilin 2, peroxiredoxina 2, y lipocalina-2 en comparación con los controles. La extensión de Cofilin 2, una de las muchas proteínas bien establecidas dentro de la patología de la EA, estaba fuertemente correlacionada con el curso temporal de la patología de la PC, lo que indica una correlación molecular particular entre la PC y la EA.

DNA
MBS6507400-005mg MyBiosource
DNA
MBS6507400-5x005mg MyBiosource
4-Amino Biphenyl DNA (4-AMBP DNA, 4-Aminobiphenyl DNA)
MBS600356-01mL MyBiosource
4-Amino Biphenyl DNA (4-AMBP DNA, 4-Aminobiphenyl DNA)
MBS600356-5x01mL MyBiosource
T4 DNA Ligase (T4 DNA) Enzyme
abx073011-25g Abbexa

Además, los resultados in vivo confirmaron que la extensión de Cofilin 2 se elevó considerablemente junto con una mejora distinguida de la fosforilación de la proteína fosfatasa 2 (PP2A) y la proteína tau dentro de los lisados celulares de las células SK-N-SH APPwt tratadas con Porphyromonas gingivalis (P.g-LPS). La inhibición de Cofilin 2 dio lugar a una disminución puntiforme de la fosforilación de tau dependiente de PP2A.

Protein-Export Protein SecB (SecB) Protein
Abbexa
Protein-Export Protein SecB (SecB) Protein
Abbexa
Protein-Export Protein SecB (SecB) Protein
Abbexa

Por otra parte, el desarrollo de tumores cuestión (TGF) -β1 fue una de las citoquinas inflamatorias esenciales para la Pg-LPS inducida por Cofilin 2 upregulation en SK-N-SH APPwt células. Estos resultados confirmaron la irritación servido porque el vínculo entre CP y AD, mientras que las proteínas inflamatorias asociadas puede muy bien ser lo importante enlazadores entre las 2 dolencias.

Paraffin Wax
Toronto Research Chemicals
Paraffin wax pellets
EWC Diagnostics
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Paraffin wax Pellets
EWC Diagnostics
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EWC Diagnostics

Averiguar la afiliación entre CP y AD en el mecanismo molecular no sólo mantener la prueba directa de la afiliación entre las 2 enfermedades, pero, además, presentar un nuevo enfoque de la marca de detener y tratar AD: la prevención eficaz y la terapia de CP podría funcionar una metodología útil para aliviar el evento de AD.

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Bioingentech
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Bioingentech
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Análisis de un ensayo inmunoenzimático (ELISA) para el análisis serológico de la sarna sarcóptica canina

Resumen El objetivo de esta investigación era evaluar una prueba de serodiagnóstico (ensayo inmunoenzimático, ELISA) de la sarna sarcóptica canina y caracterizar el antígeno de la prueba, basado principalmente en el ácaro Sarcoptes scabiei var. vulpes. El ELISA, utilizado con sueros de 359 caninos sospechosos de padecer sarna sarcóptica, confirmó una sensibilidad y especificidad del 92% y el 96%, respectivamente.

Rat Cholesterol ELISA ELISA
E01A11128 BlueGene
Goat Cholesterol ELISA ELISA
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Sheep Cholesterol ELISA ELISA
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La electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato sódico (SDS-PAGE) del antígeno empleado en la prueba ELISA reveló bandas polipeptídicas con pesos moleculares comprendidos entre 14 y 164 kDa. En los análisis Western blot dominaron los antígenos de pesos moleculares comprendidos entre 62 y 64 kDa. Significativamente dominantes han sido los antígenos de 164 y 147 kDa.

Rat Cholesterol ELISA ELISA
E01A11128 BlueGene
Rat Cholesterol ELISA ELISA
E02C0745-48wellsplate BlueGene

Caracterización preliminar de una nueva mezcla de colagenasas clostridiales recombinantes

Las colagenasas clostridiales son importantes agentes biotecnológicos de disociación de tejidos debido a su capacidad para escindir diversos tipos de colágeno. La estandarización de los protocolos basados en colagenasas se ha visto dificultada por las impurezas de los productos fabricados a partir de Clostridium histolyticum. Para reforzar el proceso de purificación, hemos producido colagenasas recombinantes G y H aprovechando el sistema de expresión de Escherichia coli.

Las secuencias genéticas respectivas se derivaron de C. histolyticum y se modificaron mediante la adición de una etiqueta de polihistidina C-terminal. El microorganismo cosechado se ha lisado y la proteína colagenasa se ha purificado por afinidad utilizando una columna His-tag. La pureza, identificación e integridad de las colagenasas G y H eluidas se determinaron mediante electroforesis SDS y Western blot.

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0-120-0009 Biologics
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0-120-0010 Biologics
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0-120-0011 Biologics
19 mm Diameter Tapped Titanium Tip
0-120-0012 Biologics

La actividad proteolítica de la mezcla de colagenasas G y H (rColGH) se determinó mediante el ensayo FALGPA habitual. El ejercicio de disociación tisular se verificó utilizando una metodología estandarizada para el aislamiento de islotes pancreáticos de rata. La biocompatibilidad de la mezcla se validó mediante un ensayo normalizado de viabilidad de los islotes aislados.

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0-120-0011 Biologics

Se han producido dos lotes de rColGH y se han comparado con una colagenasa comercial. Basándonos principalmente en nuestros resultados, llegamos a la conclusión de que la rColGH es una colagenasa recombinante nueva, útil y no tóxica, que requiere una mayor caracterización y optimización de la mezcla para convertirla en un producto comercial agresivo.

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