Se ha demostrado la desregulación de miARN en la transdiferenciación de miofibroblastos y la activación de CAF, sin embargo, su expresión varía entre las variedades de células y con la táctica de inducción de fibroblastos.
Aquí, el perfil de expresión de miRNA en humanos principales fibroblastos orales manipulados con TGF-β1, para derivar una miofibroblástica, CAF-como fenotipo, se decidió en comparación con los fibroblastos no tratados. La transdiferenciación de los miofibroblastos se determinó mediante la expresión de actina de músculo liso alfa (α-SMA) y fibronectina-1 más área A (FN-EDA1) utilizando PCR cuantitativa en tiempo real (qRT-PCR) y western blot.
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La formación de fibras de estrés se evaluó mediante microscopía de fluorescencia, y los ajustes relacionados en la contractilidad se han evaluado mediante ensayos de contracción de colágeno. Las vesículas extracelulares (EVs) se han purificado mediante el uso de la cromatografía de exclusión de medición y ultracentrifugación y su medición y el enfoque se han decidido por la evaluación de seguimiento de nanopartículas. perfiles de expresión de miRNA en fibroblastos orales manipulados con TGF-β1 y sus vesículas extracelulares se llevó a cabo utilizando tarjetas de juego de matriz de baja densidad de mosaico.
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La base de datos de anotación, visualización y descubrimiento incorporado (DAVID) se utilizó para llevar a cabo la evaluación de enriquecimiento de propósito y vía de genes objetivo. En esta investigación, TGF-β1 indujo un fenotipo miofibroblástico en fibroblastos orales regulares, según lo evaluado por la expresión de marcadores moleculares, la formación de fibras de estrés y la contractilidad elevada.
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La evaluación mediante TaqMan Low-Density Array (TLDA) demostró que miR-503 y miR-708 se habían regulado al alza de forma considerable, mientras que miR-1276 se había regulado a la baja de forma considerable en los fibroblastos orales tratados con TGF-β1 (en lo sucesivo denominados CAF derivados experimentalmente, eCAF). La evaluación de enriquecimiento de genes con fines específicos confirmó que los miARN candidatos tienen el potencial de modular numerosas vías, junto con las vías de señalización de la proteína 1 relacionada con Ras (Rap1), PI3K-Akt y el factor de necrosis tumoral (TNF).
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Además, se han detectado rangos alterados de una serie de miRNAs en EV eCAF, junto con miR-142 y miR-222. No se han detectado variaciones en la medida o abundancia de EV entre los eCAF y los fibroblastos orales normales (NOF). Se observó poco solapamiento entre los ajustes en los perfiles de miARN móviles y EV, lo que sugiere el potencial de carga selectiva de miARN EV.
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La investigación revela miRNA firma de expresión puede muy bien estar preocupado en myofibroblast transdiferenciación y la carga de miRNA de su EV, ofreciendo nueva percepción en la participación de miRNA en CAF crecimiento y rendimiento.
La evaluación internacional de la expresión génica de los miofibroblastos de la esclerosis sistémica demuestra una marcada mejora dentro de la expresión de una serie de genes NBPF
Los miofibroblastos son las principales células efectoras responsables de la fibrosis tisular exagerada en la esclerosis sistémica (SSc). A pesar de su importancia en la patogénesis de la SSc, no se ha descrito el transcriptoma particular de los miofibroblastos de la SSc. El objetivo de esta investigación fue establecer las variaciones del transcriptoma entre los miofibroblastos de la SSc y las células no miofibroblásticas.
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Alfa {smooth} actina muscular (α-SMA) que expresan miofibroblastos y α-SMA células desfavorables han sido removidos mediante láser aprovechar microdisección de cultivos de células dérmicas de 4 enfermos con SSc difusa de reciente aparición. Se extrajo ARNm completo de cada población celular, se amplificó y se analizó mediante microarrays.
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. Los resultados de determinados genes se validaron mediante Western blots e inmunohistoquímica. La evaluación del transcriptoma reveló 97 transcripciones expresadas diferencialmente en miofibroblastos de SSc en contraste con los no miofibroblastos. La agrupación por anotación de los transcritos específicos de los miofibroblastos de la SSc no logró señalar una firma TGF-β. Probablemente los transcritos más representados correspondían a una serie de genes totalmente diferentes de la Neuroblastoma Breakpoint Household (NBPF) de genes.
| Beta2-Microglobulin ELISA kit ELISA Kit | |||
| LF-EK60047 | |||
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NBPF genes son extremadamente ampliado en las personas sin embargo no suelen ser actuales en murino o genomas de rata. La investigación in vitro utilizando fibroblastos dérmicos SSc cultivadas e inmunohistoquímica de los poros y la piel SSc afectados confirmó elevada expresión NBPF en SSc. Estos resultados apuntan a que los miofibroblastos SSc caracterizan un linaje celular singular que expresa un transcriptoma seleccionado que cuenta con rangos muy excesivos de transcripciones equivalentes a bastantes genes NBPF.
| DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library | |
| L1033-.1 | ApexBio |
| DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library | |
| L1033-.25 | ApexBio |
| DiscoveryProbe? DNA Damage/DNA Repair Library | |
| L1033-5 | ApexBio |
| T7 DNA | |
| 310-005 | GeneOn |
| T7 DNA | |
| 310-025 | GeneOn |
El tirosol retrasa la inducción de fibrosis en ratas
La fibrosis hepática, que aún no tiene una terapia normal debido a su patogénesis avanzada, es una razón vital detrás de la mortalidad y la morbilidad. En esta investigación, se pretendía examinar los posibles resultados protectores y antifibróticos del tirosol en el hígado mediante estrategias histopatológicas, inmunohistoquímicas, bioquímicas y moleculares en ratas con lesión hepática inducida por tioacetamida (TAA).
| Protein G Protein | |||
| Abbexa | |||
| Protein G Protein | |||
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La investigación se llevó a cabo en 4 equipos con ocho ratas en cada grupo. Los equipos creados son, respectivamente, gestión, TAA, tirosol y TAA + tirosol. La lesión hepática se indujo en los equipos TAA y TAA +tirosol mediante la adición de TAA (200 mg/L) al agua de consumo. Se administró tirosol (20 mg/kg/p.v./día) por sonda oral a los equipos de tirosol y TAA + tirosol durante 10 semanas.
| Paraffin Wax Dispenser | |||
| Scientific Laboratory Supplies | |||
| Paraffin wax, granular (56 - 60) | |||
| Glentham Life Sciences | |||
| Paraffin wax, granular (56 - 60) | |||
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| Paraffin wax, granular (56 - 60) | |||
| Glentham Life Sciences | |||
| Paraffin wax, granular (56 - 60) | |||
| Glentham Life Sciences | |||
Los resultados de esta investigación muestran que el consumo de tirosol aliviado los ajustes histopatológicos como la irritación, degeneración, y en particular la fibrosis inducida por TAA en el hígado. Además, la administración de tirosol atenuó considerablemente la expresión de actina muscular alfa lisa (α-SMA) y la expresión de apoptosis.
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| Bioingentech | |||
| MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit | |||
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| PCR Mix | |||
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Bioquímicamente, se decidió que tirosol elevado glutatión (GSH) grado, glutatión peroxidasa (GSH.Px), y catalasa (CAT) acciones y confirmó la eficacia antioxidante mediante la disminución de malondialdehído (MDA) grado. Además, disminuyó la irritación y la fibrosis mediante la reducción de los rangos de expresión génica del factor de necrosis tumoral alfa (TNF-α), interleucina-6 (IL-6), y el factor de desarrollo de remodelación-beta (TGF-β1). Western blot evaluación reveló además comparable conduce a la expresión de TGF-β1.
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Debido a esto, el tirosol suprimió la fibrogénesis debido a sus resultados antioxidantes, antiinflamatorios y antiapoptóticos y confirmó un impacto antifibrótico dentro del hígado.
Se sabe que el tirosol, un antioxidante fenólico puro presente en el aceite de oliva, tiene propiedades neuroprotectoras, cardioprotectoras, antiinflamatorias y anticancerígenas. En esta investigación, el tirosol suprimió la fibrogénesis debido a sus efectos antioxidantes, antiinflamatorios y antiapoptóticos, y confirmó un efecto antifibrótico en el hígado.
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El aceite de oliva ocupa un lugar esencial en el programa de adelgazamiento mediterráneo, que reduce la incidencia de enfermedades energéticas. Se cree que el impacto antifibrótico del tirosol desempeña una tarea en esta función. Debido a esto, se cree que el tirosol puede ser utilizado para detener o desacelerar las enfermedades del hígado de energía.
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Nuevos controles de carga para Western blot de esperma
La medición del grado de expresión de las proteínas desempeña una función fundamental en la investigación tanto orgánica como médica. Las proteínas de mantenimiento de la casa, normalmente codificadas por genes de mantenimiento de la casa, se utilizan como proteínas de gestión de la carga para normalizar la expresión proteica. Evidentemente, unos requisitos de referencia correctos son importantes para una evaluación amplia de la expresión proteica.
Sin embargo, nuestra investigación confirmó que las proteínas de normalización ampliamente utilizadas, cuyos rangos de expresión variaron enormemente entre las muestras de esperma, han sido inadecuadas para la normalización del conocimiento. Para descubrir las proteínas expresadas de forma constante en los espermatozoides, se analizaron una serie de conocimientos transcriptoma impreso de los espermatozoides.
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Se han elegido siete proteínas cuyos rangos de expresión han sido comparativamente seguros (valores de variación del coeficiente inferiores a 0,35) y se han evaluado adicionalmente mediante respuesta cuantitativa en cadena de la polimerasa en tiempo real, Western Blot (WB) e inmunocitoquímica.
Fuentes :
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